Imunoelektroforezė

Imunoelektroforezė naudojamas monokloninių antikūnų laboratoriniam diagnostiniam nustatymui paciento kraujyje. Monokloniniai antikūnai yra gaunami iš tos pačios ląstelės ir yra nukreipti prieš tuos pačius antigenus. Dėl šios priežasties jie turi būti vertinami kaip patologiniai ir, jei įrodyta, pasireiškia tokiomis ligomis kaip Waldenströmo liga.

Kas yra imunoelektroforezė?

Jonų mobilumas yra skirtingas. Šis skirtingas mobilumas yra elektroforezės procedūros pagrindas. Šie metodai atskiria skirtingas medžiagas, naudodami elektrinius laukus ir gravitaciją. Lauke gerai žinomas metodas yra imunoelektroforezė.

Tai yra kokybinis diagnostikos metodas, naudojamas aptikti monokloninius antikūnus. Antikūnai yra imunologiškai aktyvios baltyminės medžiagos iš tam tikros ląstelių linijos. Visi monokloniniai antikūnai yra pagrįsti tais pačiais B limfocitais, todėl yra nukreipti prieš vieną epitopą. Kiekvienas natūralus imuninis atsakas į įsiveržiančius antigenus atitinka polikloninį atsaką, todėl yra nukreiptas prieš skirtingus epitopus. Taigi monokloninis imuninis atsakas rodo patologinius kūno procesus.

Monokloniniai antikūnai labai specifiškai suriša skirtingas molekules. Šis surišimas gali būti įrodytas imunoelektroforezės būdu. Procedūra yra kokybinė laboratorinės diagnostikos procedūra, kurią sudaro dviejų tipų procedūros: serumo elektroforezė ir imunodifuzija.

Funkcija, poveikis ir tikslai

Imunoelektroforezė sujungia serumo elektroforezės metodiką su imunodifuzija. Paciento serumas dedamas ant agarozės gelio arba celiuliozės acetato plėvelės. Taip pat taikomas kontrolinis serumas. Po taikymo pavyzdžiai atsiskiriami elektroforetiškai. Tarp dalijamųjų linijų yra naudojami serumai, IgG, IgA, IgM, acto rūgštis normaliai elektroforezei atlikti ir kappa bei lambda.

Tai sukuria reakciją su paciento serume esančiais antikūnais, kurie sukuria kritulių linijas. Atsižvelgiant į naudojamą antiserumą ir atskirų linijų padėtį bei formą, galima padaryti išvadas apie imunoglobulinus, esančius su kappa ar lambda lengvomis grandinėmis. Lambda juostos atveju yra laisvų lengvųjų grandinių, sudarytų iš antikūnų. Laboratorija pateikia papildomų įrodymų per retus IgE ir IgD, kurie leidžia tiksliai nustatyti imunoglobulinus. Imunodifuzinės elektroforezės metodas vyksta pagal Pierre Grabar ir Curtis Williams ir atitinka baltymų agarozės gelio elektroforezės ir antikūnų difuzijos derinį.

Pirmiausia vyksta agarozės gelio elektroforezė. Vėliau esantys antikūnai difunduoja prieš antigenų juostas ir taip sukuria nuosėdas. Reikėtų atskirti šią ir Laurelio raketų imunoelektroforezę, kuri atitinka baltymų elektroforezę agarozės gelyje, kurių kiekviename yra tam tikros koncentracijos antikūnai. Gelyje yra šiek tiek bazinio buferio, kuris tik leidžia antigenams migruoti ir, veikdamas šiek tiek šarminį pH, daugumą antikūnų nustumia į izoelektrinį tašką, kol jie nustos judėti elektroforetiškai.

Raketos imunoelektroforezės pradžioje yra antigeno perteklius, todėl susidaro tirpūs antigeno ir antikūno kompleksai. Elektroforezės metu taip pat jungiasi tarp antigenų ir kitų antikūnų. Tokiu būdu lygiavertiškumo taške susidaro imunoprecipitai, kurie primena raketas primenančias figūras, kurių aukštis proporcingas antigeno koncentracijai. Norint įvertinti bandymą, išmatuojamas kritulių aukštis.

Savo vaistus galite rasti čia

Rizika, šalutinis poveikis ir pavojai

Monokloninių antikūnų nustatymas yra ypač svarbus diagnozuojant išsėtinę mielomą ir Waldenströmo ligą. Pateikti įrodymai kalba apie piktybinę imuninių ląstelių degeneraciją. Išsėtinė mieloma atitinka kaulų čiulpų vėžį, kuriam būdingas piktybinis antikūnus gaminančių ląstelių dauginimasis plazmoje.

Šios plazmos ląstelės gamina antikūnus ir jų fragmentus. Piktybinės plazmos ląstelės visada yra iš bendros pirmtako ląstelės, todėl genetiškai tapačios. Jie gamina tik monokloninius antikūnus. Šios ligos piktybinis navikas gali atitikti ikivėžinę stadiją, tačiau ji taip pat gali pasiekti labai piktybinę stadiją, kuri negydant greitai mirtina. Ligos simptomai atsiranda dėl piktybinio ląstelių augimo arba dėl antikūnų ir antikūnų fragmentų. Dažniausi simptomai yra kaulų skausmas, kaulų tirpimas ir savaiminiai lūžiai.

Dažnai padidėja kalcio kiekis kraujyje. Be to, nenormalūs antikūnai dažnai nusėda audinyje ir sukelia organų funkcinius sutrikimus, kurie gali sukelti tokius simptomus kaip inkstų nepakankamumas ar sutrikusi kraujotaka. Waldströmo liga taip pat yra piktybinė naviko liga. Tiksliau, tai piktybinė limfomos liga, priskiriama lėtai progresuojančioms ir beveik besimptomėms B ląstelių ne Hodžkino limfomoms. Daugeliu atvejų liga gali būti nustatyta nenormali monokloninio IgM gamyba dėl piktybinių limfomos ląstelių aktyvumo.

Savo savybėmis Waldenströmo liga yra labai panaši į daugybinę mielomą, tačiau paprastai pasireiškia palankesnė eiga. Daugumai pacientų, sergančių Waldenströmo liga, diagnozavimo metu jų simptomai beveik nėra simptomai. Kiti pacientai anksti pasireiškia simptomais, tokiais kaip nespecifinis nuovargis ar periferinė neuropatija, kuriuos sukelia monokloninio IgM nusėdimas mielino apvalkale. Net maži IgM kiekiai gali sukelti polineuropatiją. Kitiems pacientams polineuropatija neatsiranda, net esant dideliam lygiui. Be to, gali atsirasti nespecifiniai simptomai, tokie kaip karščiavimas, nepageidaujamas svorio metimas ar naktinis prakaitavimas. Taip pat būdingas kaulų skausmas.

Dėl per didelio IgM gamybos, kraujas tampa hiperviskoks, todėl minėti simptomai gali būti siejami su hiperviskoziškumo sindromu. Daugeliu atvejų šis polinkis į kraujavimą pasireiškia dažnu kraujavimu iš nosies, galvos skausmais, bendru negalavimu ar neryškiu matymu ir akustiniais skundais. Norint nustatyti tokio tipo piktybines ligas, imunoelektroforezė jau seniai tapo standartine diagnostine procedūra.