FISH testas

Iš FISH testas yra mikroskopinis chromosomų tyrimas nustatant krūties, skrandžio ir lėtinės limfocitinės leukemijos prenatalinę ir karcinomos diagnozes. Tyrimu, kurio rezultatas pateikiamas per 1–2 dienas, pirmiausia galima nustatyti chromosomų anomalijas, kurias galima atsekti pakitusiame tam tikrų chromosomų chromosomų rinkinyje. Tyrimas atliekamas tik kaip lydimasis arba preliminarus išsamios chromosomų analizės testas, kurio rezultatai pateikiami tik praėjus 2–3 savaitėms po ląstelių pašalinimo.

Kas yra FISH testas?

FISH testas (Hibridizacija in situ) atliekant prenatalinę diagnozę, galima daryti išvadas apie pakitusį tam tikrų chromosomų chromosomų rinkinį. Norint atlikti FISH testą, reikia mažiausiai 50 nekultivuotų vaisiaus ląstelių (amniono ląstelių), paimtų iš amniono skysčio (maždaug 2 - 3 ml). Alternatyvus būdas gauti tinkamas ląsteles yra chorioninio villus mėginių ėmimas, kurio metu ląstelės paimamos iš virkštelės tvirtinimo srities biopsijos būdu.

Speciali procedūra leidžia atskirti 13, 18, 21, X ir Y chromosomų atskiras sruogas fluorescencinėmis spalvomis, kad galima trisomija būtų pastebima dėl trijų, o ne dviejų homologinių chromosomos gijų. . Sergant skrandžio ir krūties vėžiu, FISH testas gali būti naudojamas norint patikrinti, ar navikas turi daugiau nei dvi HER2 / neu geno (žmogaus epidermio augimo faktoriaus receptoriaus) kopijas, o tai turi įtakos chemoterapijos tipui. Sergant lėtine limfocitine leukemija, dažniausias tam tikrų genų chromosomų poslinkis gali būti nustatomas atliekant keletą FISH testų analizių, paimtų iš kaulų čiulpų ir periferinio kraujo, ir tai taip pat turi įtakos terapijai.

Funkcija, poveikis ir tikslai

Atskirų ląstelių branduolių chromosomos yra padalijamos jų dvigubos spiralės struktūra specialiu cheminiu būdu arba veikiant šilumai, o chromosomoms būdingi DNR zondai su atitinkama komplementarine DNR seka jungiasi prie „jų“ specifinių chromosomų. DNR zondai yra pažymėti skirtingų spalvų fluorescencinėmis spalvomis, kad pažymėtas chromosomas būtų galima atskirti viena nuo kitos naudojant specialią programinę įrangą ir suskaičiuoti automatizuotu būdu.

Yra žinomi Ž. B. Trisomijos, kuriose vienoje chromosomoje yra ne trys chromosomos sruogos, o trys, taip pat žinomos vadinamosios monosomijos, kuriose yra tik viena X chromosomos grandinė ir trys ar keturios visų chromosomų homologinės sruogos. Svarbiausi chromosomų pokyčiai, kuriuos galima nustatyti atliekant FISH testą prenatalinėje diagnozėje, yra Ullricho Turnerio sindromas (X monosomija), trigubo X sindromas (trisomija arba X polizomija), Klinefelterio sindromas, kuriame arba dalis somatinių ląstelių berniukams turi papildomą X chromosomą (XXY, o ne XY), Dauno sindromą (21 trisomija), Edvardo sindromą (18 trisomija) ir Patau sindromą (13 trisomija).

X monosomija, kurioje mergaitės turi tik vieną X chromosomą, paprastai yra mirtina, tai reiškia, kad maždaug 98% atvejų tai sukelia persileidimą per pirmuosius tris nėštumo mėnesius. Gimdymas bet kokiu atveju mergaičių gyvenimo trukmė yra normali, jos vidutinio intelekto, tačiau dažnai kenčia nuo daugybės vidaus organų apsigimimų ir dažniausiai yra sterilios. Trigubo X sindromas su chromosomų rinkiniu XXX) pasireiškia tik mergaitėms. Galimas normalus nėštumas ir gimdymas.

Dažniausiai ūgio moterys, turinčios trigubą X chromosomą, gali normaliai gyventi ir paprastai neturi fizinių anomalijų, nors mokymosi sunkumai nėra neįprasti ir kyla problemų dėl smulkiosios motorikos. Klinefelterio sindromui, kuris gali paveikti tik berniukus ir vyrus, būdinga papildoma X chromosoma, esanti visose kūno ląstelėse arba tik iš dalies. Fizinės savybės yra aukštesnės nei vidutinis, kai rankos ir kojos yra neįprastai ilgos. Dėl Klinefelterio sindromo paprastai sumažėja sėklidžių augimas ir sumažėja testosterono išsiskyrimas.

Dauno sindromas, sinonimiškas 21-ąja trisomija, dažniausiai susijęs su tam tikromis fizinėmis savybėmis ir su pažinimo apribojimais. Yra skirtingos 21-os trisomijos formos, iš kurių maždaug 95% atvejų vyrauja vadinamoji laisvoji trisomija. 18-osios trombos (Edvardso sindromas) daugeliu atvejų sukelia persileidimą, yra susijusios su įvairiomis fizinėmis savybėmis, o gyvenimo trukmė yra tik kelios dienos. 13-oji tromija (Pätau sindromas) taip pat pasižymi daugybe fizinių ypatumų ir nepageidaujamų pokyčių, kurie dažnai sukelia persileidimą ar negyvą gimdymą. Tikėtina, kad vaikų gyvenimo trukmė tik keleri metai.

Prenatalinio FISH tyrimo tikslas - ankstyvame etape nustatyti žinomus chromosomų anomalijas, kad tėvams būtų pasiūlyta teisėto aborto alternatyva, kad vaikas būtų gimdytas. Sergant krūties ir kepenų vėžiu, naudojant FISH testą, karcinomos gali būti patikrintos dėl padidėjusio HER2 / neu geno skaičiaus. Teigiamu atveju padidėja augimo faktoriaus receptorių, reaguojančių į tam tikrą chemoterapiją, formavimasis. Taip pat galimi FISH tyrimai, siekiant nustatyti specifinius lėtinės limfoleukemijos (LLL) genetinius anomalijas, kurie pagerina veiksmingų chemoterapijos priemonių sudėtį.

Rizika, šalutinis poveikis ir pavojai

Pats FISH testas nėra susijęs su jokia rizika ar pavojumi. Tik ląstelių, kurios bus tiriamos atliekant biopsiją ar imant amniono skystį, ekstrahavimas (amniocentezė) yra susijęs su nedidele infekcijos rizika dėl jų invazinio pobūdžio. Ypatumas yra tas, kad FISH testas gali atskleisti tam tikrus chromosomų defektus, tačiau negalima garantuoti, kad gavus neigiamą rezultatą nėra chromosomų aberacijų, nes ne visas anomalijas galima aptikti atliekant FISH testą. Jei tyrimo rezultatas yra teigiamas, reikia patvirtinti kitas diagnostikos procedūras, kad rezultatas būtų patvirtintas arba paneigtas kaip klaidingas.