Tiesioginis imunofluorescencijos nustatymas

Audinių struktūrų, antikūnų ir patogenų įrodymas imuniniu būdu yra populiarus, šiuolaikiškas ir tikslus. Imunofluorescencija reiškia imuninės sistemos žymėjimą paruoštais fluorescenciniais antikūnais, kurie yra sukurti švyti ultravioletinėje šviesoje.

Prie Tiesioginis imunofluorescencijos nustatymas substratas tiriamas tiesiogiai su šviesiais antikūnais, be pirminių antikūnų ar dirbtinių antigenų.

Kas yra tiesioginis imunofluorescencijos nustatymas?

Tiesioginis imunofluorescencijos nustatymas yra diagnostikos metodas, pagrįstas žiniomis apie imunologiją, imuninį dažymą ir imunohistochemiją. Daugiausia dėmesio skiriama antikūnų sugebėjimui prisijungti prie konkrečių audinio taškų arba serumo antigenų. Šios vietos yra epitopai.

Biocheminėje diagnostikoje yra dirbtinių antikūnų ar mimetikų (vienaskaitiškai: mimetinių), kurie leidžia šiuos antikūnų ir antigeno ryšius pažymėti fluorescencija arba radioaktyvumu. Dirbtiniai antikūnų konjugatai, viena vertus, jungiasi prie epitopų, ir, kita vertus, turi fluorescencinį žymeklį imunofluorescencijos atveju. Tai yra alternatyva naudoti radioaktyvius žymenis. Ypatingas tiesioginio imunofluorescencinio aptikimo dalykas, palyginti su netiesioginiu aptikimu, yra tas, kad antikūnas, kuris jungiasi su tiriamoje medžiagoje esančiu antigeno epitopu, taip pat yra antikūno konjugatas su fluorescenciniu žymekliu. Papildomi antikūnai nėra būtini tiesioginiam aptikimui.

Fluoresceinas, šviečiantis ultravioletinėje šviesoje, ir fluoresceino izotiocianatas (FITC) yra naudojami kaip dažai dirbtinių antikūnų konjugatams gaminti imunofluorescenciniu būdu. Kol kas tai skaityti šiek tiek sudėtinga, tačiau tiesioginis imuninės fluorescencijos nustatymas yra įprastas medicinos laboratorinės diagnostikos metodas, skirtas įvairiausiems medicinos klausimams. Antikūnai su fluorescenciniais dažais yra paruošti pardavimui.

Funkcija, poveikis ir tikslai

Tiriant audinius, galima nustatyti tiesioginį imunofluorescencinį aptikimą, siekiant dažyti tam tikras audinių struktūras. Bet jie yra ir atskiroms ląstelėms. Pagrindinį vaidmenį čia vaidina srauto citometrija. Galiausiai yra kietosios ir skystosios fazės imuniniai tyrimai. Audinių imunofluorescenciniai tyrimai yra ypač svarbūs onkologijoje, t. Y. Gydant vėžines ligas.

Navikui specifinius navikinius antigenus galima nustatyti tiesiogiai imunofluorescencijos būdu. Šie navikų audinių mėginių tyrimai dažnai yra svarbūs norint išsiaiškinti, iš kur organizme atsirado metastazių, arba norint įvertinti, ar navikas yra gerybinis ar piktybinis. Tiriant atskiras ląsteles tiesiogiai nustatant imunofluorescencinę analizę, randami viruso antigenai, bakteriniai antigenai ir kiti epitopai.

Pvz., Galite sužinoti, ar ląstelės yra užkrėstos virusu, ir kurioje infekcijos ciklo stadijoje yra ląstelės. Pavadinimas FACS (= su fluorescencija suaktyvinamas ląstelių rūšiavimas) yra labai efektyvus srauto citometrijos metodas, kai ląstelės, pažymėtos fluorescencija, paskirstomos į skirtingus mėgintuvėlius, atsižvelgiant į spalvos tipą. Ši procedūra yra svarbi imunologijoje, hematologijoje ir infekcinėse ligose.

Imunofluorescenciniai imuniniai tyrimai leidžia tiesiogiai nustatyti aplinkos toksinus, genetiškai modifikuotus organizmus ir tam tikrus maisto priedus. Šiame eksperimentiniame darinyje visada yra kieta ir skysta fazės. Taip pat būtų galima tiesiogiai aptikti daugybę patogenų, įskaitant ŽIV virusą, kuris sukelia AIDS. Tačiau nustatant infekcines ir autoimunines ligas dažnai reikia nustatyti antikūnus, o ne antigenus. Tai yra gynybinės molekulės, kurias suformuoja kūno imuninė sistema. Remiantis čia pateiktu apibrėžimu, tokie įrodymai tada nėra tiesioginiai įrodymai, nes fluorescenciniai antikūnai nėra tiesiogiai susieti su paties organizmo antigenais, bet su bandymo tvarkos antigenais.

Šie antigenai eksperimento metu yra sujungti su paties organizmo antikūnais. Tiesioginis imunofluorescencinis įprastų infekcijų, pavyzdžiui, ŽIV virusų ir chlamidijų, aptikimas naudojamas tik specialiuose aptikimo ir patvirtinimo tyrimuose. Yra testų dar daugybei ligų. Daugeliu atvejų netiesioginis antikūnų nustatymas yra tinkamesnis užkrečiamosioms ligoms, nes paties organizmo imuninė sistema turi išradingą sugebėjimą atsiminti ankstesnes infekcijas. Kitose situacijose tiesioginis antigenų aptikimas ir netiesioginis antikūnų nustatymas papildo vienas kitą. Pastarieji rodo, kad infekcija buvo įvykdyta anksčiau, o pirmieji pateikia tikslesnę informaciją apie dabartinę patogeno veiklos būklę.

Savo vaistus galite rasti čia

Rizika, šalutinis poveikis ir pavojai

Tiesiogiai nustatant imunofluorescencinę medžiagą, kaip ir visais medicininiais įrodymais, yra du pavojai: klaidingo, teigiamo rezultato ir klaidingo, neigiamo rezultato rizika. Neteisingi, teigiami rezultatai sukelia pacientui psichologinį diskomfortą ir didelį stresą.

Todėl prie teigiamų rezultatų pridedamos papildomos tyrimo procedūros, ypač jei diagnozė lemia drastiškus gyvenimo pokyčius. Klaidingo, neigiamo rezultato rizika yra tai, kad pacientas laiku neišmoksta apie grėsmę savo sveikatai ir galbūt net visuomenės sveikatai. Todėl verta atlikti daugybę tyrimų ir paruošti bei pasiūlyti daugybę įvairių imunofluorescencinių tiesioginių detektorių, paruoštų pardavimui. Kartu su kitais tiesioginiais ir netiesioginiais ligų ir patologijų nustatymo metodais tai padidina diagnozės tikslumą.

Tiesioginis aptikimas grindžiamas antikūnų konjugatu, kuris, viena vertus, jungiasi su antigenų epitopais ir, kita vertus, sukelia fluorescenciją. Todėl toks produktas naudojamas tik vieno tipo bandymo procedūroms ir nenaudojamas kitoms bandymo procedūrų rūšims.Tai yra svarbus procedūrinis skirtumas tarp netiesioginių įrodymų, kai prieš fluorescencinius antikūnus yra pirminiai antikūnai, skirti epitopams surišti. Todėl antikūnų konjugatas yra tinkamas skirtingiems tyrimams. Šis procedūrinis skirtumas skiriasi nuo medicininio skirtumo tarp netiesioginio antikūnų nustatymo ir tiesioginio antigenų aptikimo.